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taqman探针法的应用场景 |
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Taqman探针本质上是FRET寡核苷酸探针,其5'端标记有荧光染料报告基团(Fluorophore),3'端标记有淬灭基团(Quencher)。 TaqMan探针法qPCR的原理TaqMan探针法qPCR是实时荧光定量PCR探针法中的TaqManTAMRA探针。该探针包含5'荧光报告基团(FAM、VICorTET)和3'荧光淬灭基团(TAMRA)。 染料)。 TaqManTAMRA探针是首批为一系列应用而开发的TaqMan探针之一。 塔姆
实时荧光定量PCR实验系统的设计对于整个检测的成功至关重要。探针的设计是实验的关键,应根据其特点进行设计,以适应相应的要求。 1.TaqMan探针尽可能接近青科生物技术:修饰引物/探针的详细说明—TaqMan探针15同意·0条评论文章它是寡核苷酸探针,5'端带有荧光基团,3'端带有猝灭基团。 当探针完好无损时,报告基团发出的荧光信号被猝灭剂基团吸收。
线性探针连接至相同的寡核苷酸并且具有较短的探针序列长度。 近年来,对Taq-Man探针进行了改进,开发了TaqMan-MGB探针。在Taq-Man探针的3端添加了可插入DNA小凹槽的二氢环化吲哚卟啉三肽(DPI3)。 具体来说,TaqMan探针是包含5'报告染料和3'猝灭剂的单个DNA寡核苷酸。 典型的TaqMan探针在3'端设计有氨基或凹槽粘合剂(MGB)部分,这提高了探针的熔化温度(
1.实时荧光Taqman探针设计的一般原则:探针的选择必须保守,引物的选择也必须保守。因此,必须找到100-200bp的相对保守的片段来设计引物和探针。 即real-timePCR的扩增片段为50bp---150bp。 在寻找TaqMan荧光探针方法时,20世纪90年代,美国PerkinElmer(PE)公司开发了TaqMan荧光探针定量技术。TaqMan探针的结构是:5'端标记有报告基因(Reporter,R),如FAM(6-羧基荧光素)、VIC等。
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标签: taqman探针乙肝
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